青海發(fā)光桿菌成活率，判斷之形態(tài)學觀察法：

1、細胞內(nèi)出現(xiàn)顆?；蚩张?。

2、細胞內(nèi)如果出現(xiàn)顆粒物質(zhì)，表明細胞處于非健康狀態(tài)。

3、同樣，細胞內(nèi)出現(xiàn)空泡也說明細胞處于非健康狀態(tài)。

 細胞喪失雙折射性：

    如果發(fā)生在單層細胞：一個具有雙折射性的正常細胞逐步失去這一特征（相差顯微鏡下細胞邊緣成暈環(huán)），則提示該細胞已經(jīng)死亡，即zui終干枯死亡。

    如果發(fā)生在懸浮細胞：正常懸浮細胞清晰透明，如胞內(nèi)出現(xiàn)顆粒或變渾濁表明細胞受損，甚至死亡。

    怎樣去除死細胞？單層培養(yǎng)的細胞死亡后，一般會漂浮起來，因此不需要特殊處理。

而懸浮細胞或原代培養(yǎng)細胞則要通過密度離心（如Ficoll梯度）方法收集死細胞。

細胞成活率檢測實驗

即刻檢測實驗——

染料柜染實驗：原理——萘黑、臺盼藍以及很多其他染料均不能透過活細胞。概要——將細胞懸液與染料混勻，在低倍顯微鏡下檢查。材料包括無菌材料,即細胞；生長液；0.25%胰酶；PBSA.非滅菌材料即：血細胞計數(shù)板；生存力染料；巴斯德吸管；顯微鏡；手執(zhí)計數(shù)器。

操作步驟：

1、用胰蛋白酶消化或離心，重懸制備高深度的細胞懸液

2、取一塊干凈的血細胞計數(shù)板，將蓋玻片固定在適當位置上。

3、將一<滴細胞懸液和一滴（臺盼藍）或四滴（萘黑）染料混勻/li>

4、加至血細胞計數(shù)板的計數(shù)室中。

5、靜置1~2min（但不要放置很久，否則活細胞會受到損傷而吸收染料）。

6、將計數(shù)板置于顯微鏡下，用10倍物境找到計數(shù)網(wǎng)格。

7、青海發(fā)光桿菌計數(shù)細胞總及著色細胞的數(shù)目。

8、清洗血細胞計數(shù)板，放入盒內(nèi)。
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青海發(fā)光桿菌